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SunDigest MALDI质谱样品消化系统
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SunDigest MALDI质谱样品消化系统
温度可在4°C至50°C之间精确调节
  • 订货编号:tlyon005276
  • .
  • 人气指数:2756
  • 品牌名称:德国Sunchrom
  • 样本资料: 【索取】
  • 供货周期: 合同约定 
  • 关联标签:SunDigest MALDI质谱样品消化系统,MALDI质谱样品消化器
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  • 产品名称:SunDigest MALDI质谱样品消化系统
  • 订货号:tlyon005276
  • 品牌名称:德国Sunchrom
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MALDI质谱成像(MALDI-MSI)可以可视化在诸如人,动物或植物组织之类的样品薄片内各种分析物的空间分布。

虽然可以将基质沉积在样品上后直接将诸如药物和脂质之类的小分子电离,但无法对绝大多数蛋白质进行直接分析。需要将较大的蛋白质,膜蛋白或什至具有几个亚基的蛋白质复合物切成较小的肽片段,然后可以将其电离并通过MALDI MS分析。

事实上,成功且可重复的消化过程对于任何MALDI-MSI蛋白质都是必不可少的。

完全控制的消化过程

SunDigest消化器在标准条件下提供了完全由软件控制且高度可重复的消化过程。可精确调节4°C至50°C的温度以及理想的孵化湿度。

在溶液中进行蛋白质的典型蛋白酶消化。在进行MALDI-MSI实验的情况下,不可能在组织样品上简单地分布一层蛋白酶溶液来进行反应,因为这种“溶液中”的组织内消化将导致细胞的空间分辨率降低。分析物。代替“溶液中”,也可以在95-100%之间的高湿度下进行有效的组织内消化。此过程的最大优点是可以保留空间分辨率。当然,需要精确控制此过程以实现高效消化和可重现的结果。SunDigest是为任何类型的组织内培养建立可转移培养方案的唯一解决方案。

如今,化学修饰的胰蛋白酶通常用于组织内消化,因为它具有很高的活性和非常稳定的分子,对自溶消化具有极强的抵抗力。然而,修饰的酶显示出在50℃而不是通常使用的37℃具有最大性能(Havlis等人,Anal.Chem.2003,75,1300-1306)。因此,在50°C下对MALDI-MSI进行组织内消化是非常合理的。不仅因为它节省了时间,而且还最大限度地减少了孵育过程中分析物的扩散,这会对空间分辨率产生负面影响。

表1:蛋白质胰蛋白酶组织内消化的推荐参数
温度 湿度 孵化时间
 
37°摄氏度
95 % 4-16小时
 
50°摄氏度
95 % 2-5小时

由于与37°C相比,水在50°C时的凝结效果明显更高,因此SunDigest 消化器的盖子受到了有效的温度调节。加热的盖子可防止任何水凝结,在最坏的情况下,由于水滴落到组织表面而可能导致样品损失。加热盖对于在50°C的温度下实现高性能消化过程至关重要,这使SunDigest成为全球范围内唯一可快速安全地进行高性能组织内消化的器。反应可以在最短的时间内完成,需要考虑一个额外的因素以保持分析物的空间分辨率(图1)。

SunDigest MALDI质谱样品消化系统

图1: 使用SunDigest 消化器在50°C下胰蛋白酶消化2小时产生的两种不同肽的组织分布。图像的空间分辨率:100μm。(由曼海姆ABIMAS的BjörnMeyer提供)

操作模式

SunDigest 消化器可主动控制,调节和记录三种不同的温度:

  1. 基本温度
  2. 内部温度
    (组织温度)
  3. 覆盖温度

最佳湿度(可由操作员以百分比定义)由加热和来自水箱的冷凝水循环的合理相互作用来调节。孵育后,仪器可以自动冷却样品。

每次运行后,所有记录的参数的对应图都可以保存以供记录。图2显示了典型的SunDigest在37°C下运行两个小时的情况。

SunDigest MALDI质谱样品消化系统
图2:在37°C和95%湿度下孵育两个小时的SunDigest运行图。

对于诸如蛋白质的组织内消化之类的相对简单的应用,SunDigest以基本模式运行。用户仅需定义培养温度,培养时间和最佳湿度(图3)。所有其他开/关,加热和冷却操作均由软件自动调节。

SunDigest MALDI质谱样品消化系统

图3:SunDigest基本模式的方法设置。可以定义基本参数湿度(%),温度(°C)和消化时间。可以将样品的自动冷却程序设置为在孵育后执行。

除了这些简单的操作外,SunDigest消化器还可用于更复杂的反应程序。在智能模式下运行SunDigest,使用户能够开发由一系列开/关,加热和冷却事件组成的单独的培养程序(图4)。

SunDigest MALDI质谱样品消化系统

图4:SunDigest的智能模式的方法设置。智能模式允许设置完全由用户定义的培养程序。

图5显示了分别由图3和图4所示的基本模式和智能模式设置产生的所有记录的消化参数的示意图。在智能模式下设置的低风扇速度可减少湿度波动,从而有助于提高消化过程的效率。

SunDigest MALDI质谱样品消化系统

SunDigest MALDI质谱样品消化系统

图5:在50°C下消化两个小时的SunDigest运行图。在基本模式下于50°C和100%湿度下执行运行图[A]。消化15分钟后,使用智能模式在50°C基本温度,45°C盖子温度和2%的低风扇速度下执行运行图[B]。智能模式方法[B]可产生更一致的大约100%的高湿度,这有助于提高消化效率。

SunDigest用于组织内消化的突出特点

  • 温度可在4°C至50°C之间精确调节
  • 最佳湿度下的组织内消化过程
  • 保留空间分辨率
  • 极其节省时间:50°C时的高性能消化
  • 全面消化过程控制
  • 重现结果的关键

*本产品非医疗器械,不能用于临床诊断和治疗,仅科研用途!*  

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